Anche se il numero di nuovi casi e decessi è diminuito negli ultimi anni, la malaria è ancora una delle malattie infettive più diffuse in tutto il mondo ed uno dei più grandi problemi sanitari, soprattutto in Africa. La malattia è causata da un’infezione con il parassita Plasmodium, trasmesso dal morso della zanzara femmina Anopheles. Ci sono diversi tipi di malaria che possono essere causati da diverse specie di Plasmodium.
Attualmente a livello globale, l’incidenza dei casi di malaria (cioè numero di casi per 1000 abitanti in aree a rischio) si è ridotta, passando da 80 nel 2000, a 58 nel 2015, a 57 nel 2019. Tra il 2000 e il 2015, l’incidenza globale dei casi di malaria è diminuita del 27% mentre tra il 2015 e il 2019 è scesa di meno del 2%, mostrando un rallentamento del trend di diminuzione a partire dal 2015.
Nel 2019 circa la metà della popolazione mondiale è stata esposta al rischio di malaria. Si sono registrati 229 milioni di nuove infezioni e 409.000 decessi. Il numero più elevato di morti si è registrato nell’Africa sud-sahariana.
Circa il 95% dei decessi per malaria in tutto il mondo si concentra in 31 Paesi. Sei paesi africani, quali Nigeria (23%), Repubblica Democratica del Congo (11%), Repubblica Unita di Tanzania (5%), Mozambico (4%), Niger (4%) e Burkina Faso (4%), riportano da soli oltre il 50% di tutti i decessi per malaria registrati nel 2019.
Malaria e COVID-19
Nel World Malaria Report 2020 si evidenzia come le previsioni presentate dalla GTS non hanno potuto tener conto delle potenziali interruzioni nelle attività di controllo della malaria dovute all’attuale pandemia da COVID-19 e nonostante gli forzi globali e nazionali fatti per mantenere attivi nei Paesi endemici i servizi sanitari essenziali è probabile che a causa della emergenza pandemica nei prossimi mesi si possa registrare una morbilità e mortalità per malaria più alta del previsto.
Diagnosi precoce di malaria
Una diagnosi precoce riduce la morbidità e la mortalità della malaria.
Tutti i casi di sospetto di malaria devono essere confermati attraverso l’indagine microscopica e attraverso test rapidi (RDT)
Il metodo standard per la diagnosi di malaria è la rilevazione di Plasmodium nel sangue periferico utilizzando una “goccia spessa” con colorazione di Giemsa. Un test rapido è un’alternativa semplice, che non richiede un laboratorio e può essere eseguita da persone non addestrate.
Microscopia ottica
Il rilevamento al microscopio ottico del parassita malarico su vetrino a goccia spessa o sottile è un metodo affidabile per la diagnosi, quantificazione del parassita malarico e per l’identificazione della specie. La microscopia ottica è il metodo di riferimento per la diagnosi della malaria ampiamente utilizzato per il suo rapporto costo-efficacia.
Tuttavia presenta dei limiti che comprendono:
Soggettività : l’accuratezza della diagnosi dipende dalla competenza dell’osservatore (microscopista).
Tempo richiesto: il microscopista deve esaminare almeno 100 campi per la diagnosi di malaria.
Qualità: difficoltà a garantire una buona qualità del vetrino che è in relazione alla qualità dello striscio e della colorazione.
Test Rapidi (RDT)
RDT è un test immunocromatografico per la determinazione di specifici antigeni del parassita malarico nel sangue.
I risultati dei test sono prontamente disponibili e meno dipendenti dal personale qualificato.
Gli svantaggi includono:
- Le diverse caratteristiche degli antigeni impiegati possono influenzare la loro applicabilità per essere utilizzati nelle diverse situazioni.
- Mancanza di informazioni sulla carica parassitaria.
- La qualità eterogenea dei prodotti disponibili in commercio e l’esistenza di una variabilità inter lotto.
Rilevamento della malaria sull’ analizzatore Mindray BC-6800 PLUS
Gli aggiornamenti e le implementazioni tecnologiche apportate agli analizzatori ematologici li hanno resi molto intelligenti .
Nel canale di differenziazione (DIFF) dell’analizzatore Mindray BC-6800 PLUS, le sottopopolazioni di RBC e WBC sono differenziate in base alla loro dimensione e alla loro complessità (Figura 3).
Figura 3 Parametri dell’analizzatore BC-6800 PLUS determinati nel canale DIFF
Come validissimo mezzo di screening per l’identificazione della malaria, l’analizzatore BC-6800 PLUS fornisce un allarme (flag) dedicato denominato InR flag e la determinazione quantitativa dei globuli rossi infettati dal Plasmodio in numero assoluto InR # e per mille InR ‰ che inclusi all’interno del profilo di conta CBC.
Figura 4 Parametri InR# e InR‰ forniti dall’analizzatore BC-6800 PLUS
L’efficacia del BC-6800 PLUS nello screening della malaria
Uno studio incentrato su 30.077 casi di malaria è stato condotto in parallelo analizzando i campioni attraverso la conta automatizzata CBC sull’analizzatore BC-6800 PLUS e l’esame microscopico su goccia spessa e sottile effettuato da microscopisti esperti.
285 casi sono stati trovati positivi per P. vivax malarico all’esame microscopico.
Lo studio ha evidenziato per il test automatizzato su BC-6800 PLUS una sensibilità del 99,65% e un NPV (valore predittivo negativo) vicino al 100% per il flag InrR per P. vivax che pertanto può essere considerato un valido mezzo di screening .
- I globuli rossi infettati resistono alla lisi ed essi occupano una zona ben definita del citogramma, con un cluster ben identificabile nella rappresentazione 3D esclusiva della tecnologia Mindray SF-CUBE (Figura5).
Figura 5 Zona di localizzazione del Cluster InR a destra, in azzurro, rispetto al cluster dei neutrofili. Valore in termini quantitativi nell’ambito dei parametri RUO forniti dall’analizzatore Mindray BC-6800 PLUS.
- In molti casi di P.vivax , il valore di InR# è comparabile con il valore del conteggio microscopico. In alcuni casi la presenza di differenti piccoli cluster ad anello porta alla determinazione di un valore di InR# inferiore a quello determinato al microscopio (Figura 6).
Figura 6 Correlazione tra grado di positività alla microscopia e InR#
- Veri Positivi: pochi parametri sono stati confrontati tra i casi di malaria positivi allo striscio. Casi di controllo: casi di vetrini negativi quando il flag “InR infetti” non era presente. Casi falsi positivi: casi di vetrini negativi quando il flag “InR infetti” era presente. Ci sono state differenze significative in questi parametri (Delta WBC, InR#,InR‰) tra i due gruppi. (Tabella1)
Tabella 1 : comparazione statistica di alcuni importanti parametri all’interno dei differenti gruppi.
- InR# è comparabile con il Delta WBC (valore WBC derivato dalla conta nel canale DIFF meno valore WBC derivato dal canale WNB). InR# in alcuni casi è significativamente alto ma il delta WBC è inferiore. In questi case le cellule InR influenzano la corretta classificazione dei WBC. Un valore non corretto della conta totale di WBC è stato trovato osservando la correlazione tra delta WBC e InR# (Figura 7).
Figura 7 Correlazione tra delta WBC e InR#
Il flag InR ed il parametro inR#/InR‰ forniti dall’analizzatore BC-6800 PLUS può essere utilizzato come un indicatore per lo screening della malaria. Quando il numero di eventi cellulari di un certo tipo di morfologia anomala supera il valore soglia impostato nel software, l’analizzatore riporta di conseguenza il flag. Più alto è settato il valore del limite soglia, più bassa è la sensibilità dell’allarme. Sull’analizzatore BC-6800 PLUS è possibile settare un valore appropriato per l’utilizzo a scopo di screening nella pratica clinica.
Riferimenti
World Health Organization World Malaria report 2019. Disponibile: www-who.int/publications-detail/world-malaria-report-2019
Infected RBC flag/parameter provided by Mindray BC-6800 haematology analyzer aid the diagnosis of malaria.
Sun.etal. Malar J (2019) 18:262
https://doi.org/10.1186/s12936-019-2890-z
Evaluation of automated hematology analyser: Mindray BC-6800 plus as a screening tool for diagnosing malaria
International Journal of Research in Medical Sciences 8(5):1750-1759